背景 
在過(guò)去十年中，我們的雙鏈 RNA (dsRNA) 抗體已被廣泛用于檢測(cè)和表征具有 dsRNA 基因組或中間體的動(dòng)植物病毒。此外，抗 dsRNA 抗體可用作檢測(cè)病原體的診斷工具，包括在石蠟包埋的固定組織樣本中進(jìn)行檢測(cè)（Richardson 等，2010）。K1 單克隆抗體識(shí)別 dsRNA 的親和力與我們廣泛使用的 J2 抗體相似。可用于細(xì)胞和組織中dsRNA的組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)檢測(cè)。事實(shí)證明，在 J2 無(wú)法提供令人滿意結(jié)果的罕見(jiàn)實(shí)驗(yàn)設(shè)置中，它作為 J2 的替代品特別有用，可以解決交叉反應(yīng)和/或去除不需要的背景。K1 可用于檢測(cè)多種病毒的 dsRNA 中間體，如肝炎病毒、泰勒氏鼠腦脊髓炎病毒或日本腦炎病毒。它用于檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞和固定石蠟包埋的組織學(xué)樣品中的 dsRNA（參見(jiàn)出版物）。如果需要檢測(cè) Poly I:C，我們會(huì)高度使用 K1 而不是 J2，因?yàn)?K1 對(duì)這種合成的聚核糖核苷酸具有更高的親和力（參見(jiàn) Schönborn 等，1991，圖 2）。K1 已成功用于免疫熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù) (FACS) 和免疫捕獲方法（如斑點(diǎn)印跡和 ELISA）。J5 IgG2b 抗體識(shí)別 dsRNA 的親和力和特異性與我們的 J2 抗體非常相似（參見(jiàn) Schonborn 等，1991），但具有不同的同種型——因此可以更靈活地同時(shí)檢測(cè) dsRNA 與其他標(biāo)記物，尤其是在免疫熒光顯微鏡下, 并已被用于檢測(cè)魚(yú)病毒傳染性胰腺壞死病毒 (IPNV)（Levican-Asenjo 等人，2019 年）或 Vero 細(xì)胞中的 ECMV 的復(fù)制中間體。J5 抗體可以檢測(cè)所有測(cè)試形式的 dsRNA，包括來(lái)自登革熱病毒、腦心肌炎病毒、痘苗病毒、呼腸孤病毒或黃瓜花葉病毒等病毒的 poly(A):poly(U)、poly(I):poly(C) 和 dsRNA病毒。與我們的其他抗體類(lèi)似，J5 的 dsRNA 結(jié)合與序列無(wú)關(guān)，只要 dsRNA 的長(zhǎng)度超過(guò) 40nt。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測(cè)試。J5 抗體可以檢測(cè)所有測(cè)試形式的 dsRNA，包括來(lái)自登革熱病毒、腦心肌炎病毒、痘苗病毒、呼腸孤病毒或黃瓜花葉病毒等病毒的 poly(A):poly(U)、poly(I):poly(C) 和 dsRNA病毒。與我們的其他抗體類(lèi)似，J5 的 dsRNA 結(jié)合與序列無(wú)關(guān)，只要 dsRNA 的長(zhǎng)度超過(guò) 40nt。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測(cè)試。J5 抗體可以檢測(cè)所有測(cè)試形式的 dsRNA，包括來(lái)自登革熱病毒、腦心肌炎病毒、痘苗病毒、呼腸孤病毒或黃瓜花葉病毒等病毒的 poly(A):poly(U)、poly(I):poly(C) 和 dsRNA病毒。與我們的其他抗體類(lèi)似，J5 的 dsRNA 結(jié)合與序列無(wú)關(guān)，只要 dsRNA 的長(zhǎng)度超過(guò) 40nt。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測(cè)試。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測(cè)試。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測(cè)試。

同義詞： Anti-dsRNA mAb 比較集

來(lái)源 
雌性 DBA/2 小鼠腹膜內(nèi)注射 50 ug L-dsRNA 和 75 ug 甲基化牛血清白蛋白的混合物，乳化在*弗氏佐劑中。在幾次加強(qiáng)后，脾細(xì)胞與 Sp2/0-Agl4 骨髓瘤細(xì)胞融合以產(chǎn)生雜交瘤克隆。

產(chǎn)品 
小鼠單克隆抗體 J2 可識(shí)別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長(zhǎng)度大于或等于 40 bp。dsRNA 識(shí)別與抗原的序列和核苷酸組成無(wú)關(guān)。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 J2 識(shí)別，盡管在某些分析中它對(duì) poly (I).poly(C)比其他dsRNA抗原低約10倍。小鼠單克隆抗體 J5 可識(shí)別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長(zhǎng)度大于或等于 40 bp。dsRNA 識(shí)別與抗原的序列和核苷酸組成無(wú)關(guān)。到目前為止，研究了所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A)。poly(U) 已被 J5 識(shí)別，盡管在某些分析中它對(duì) poly(I).poly(C) 的親和力比對(duì)其他 dsRNA 抗原的親和力低約 10 倍。mAb K1 可識(shí)別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長(zhǎng)度大于或等于 40 bp。dsRNA 識(shí)別與抗原的序列和核苷酸組成無(wú)關(guān)。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識(shí)別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對(duì) poly(I).poly(C) 的親和力高于對(duì)其他 dsRNA 抗原的親和力，盡管表觀結(jié)合常數(shù)的差異在不同的實(shí)驗(yàn)條件下可能會(huì)有所不同。mAb K1 可識(shí)別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長(zhǎng)度大于或等于 40 bp。dsRNA 識(shí)別與抗原的序列和核苷酸組成無(wú)關(guān)。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識(shí)別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對(duì) poly(I).poly(C) 的親和力高于對(duì)其他 dsRNA 抗原的親和力，盡管表觀結(jié)合常數(shù)的差異在不同的實(shí)驗(yàn)條件下可能會(huì)有所不同。mAb K1 可識(shí)別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長(zhǎng)度大于或等于 40 bp。dsRNA 識(shí)別與抗原的序列和核苷酸組成無(wú)關(guān)。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識(shí)別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對(duì) poly(I).poly(C) 的親和力高于對(duì)其他 dsRNA 抗原的親和力，盡管表觀結(jié)合常數(shù)的差異在不同的實(shí)驗(yàn)條件下可能會(huì)有所不同。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識(shí)別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對(duì) poly(I).poly(C) 的親和力高于對(duì)其他 dsRNA 抗原的親和力，盡管表觀結(jié)合常數(shù)的差異在不同的實(shí)驗(yàn)條件下可能會(huì)有所不同。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識(shí)別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對(duì) poly(I).poly(C) 的親和力高于對(duì)其他 dsRNA 抗原的親和力，盡管表觀結(jié)合常數(shù)的差異在不同的實(shí)驗(yàn)條件下可能會(huì)有所不同。

配方： 每個(gè)凍干樣品都應(yīng)用 100 µl 無(wú)菌蒸餾水復(fù)溶。然后將 mAb 置于 PBS 中，不含任何穩(wěn)定劑或防腐劑，濃度為 1 mgr/ml。作為凍干程序的結(jié)果，重建的抗體可能含有少量聚集體形式的變性蛋白質(zhì)，這可能會(huì)干擾某些應(yīng)用，例如免疫組織化學(xué)（例如，通過(guò)提供高背景）。因此，我們強(qiáng)烈建議在使用和使用上清液之前對(duì)重組的抗體進(jìn)行離心（微量離心）。

純化方法： A蛋白-瓊脂糖親和層析。

純度： 凝膠電泳純 IgG 抗體。

濃度： 重構(gòu)后的濃度：通過(guò) A280 nm 測(cè)定的 1.00 mg/ml（A280 nm = 1.47 對(duì)應(yīng)于 1 mg/ml 抗體）。

應(yīng)用 
小鼠單克隆抗體 J2、J5 和 K1 可用于 ELISA、dsRNA 免疫印跡、免疫親和層析，在某些系統(tǒng)中還可用于免疫組織化學(xué)（參見(jiàn)參考資料）。對(duì)于任何特定應(yīng)用，每種抗體的最佳工作稀釋度應(yīng)通過(guò)滴定確定。請(qǐng)注意，dsRNA 免疫印跡之前的核酸分離必須通過(guò)聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行，因?yàn)閺沫傊悄z印跡后檢測(cè)的靈敏度要低得多。不用于臨床目的。僅供體外使用。

儲(chǔ)存 
重建后的抗體應(yīng)分裝并儲(chǔ)存在 -20 °C 或 -70°C。添加 10 mM 疊氮化納后，未稀釋的抗體也可以在 +4 °C 下短時(shí)間保存。對(duì)于長(zhǎng)期儲(chǔ)存，mAb 應(yīng)保持冷凍。應(yīng)避免重復(fù)冷凍/解凍循環(huán)。

運(yùn)輸條件： 在環(huán)境溫度下運(yùn)輸。

注意 
本產(chǎn)品僅供研究和體外測(cè)試使用，不適用于涉及人類(lèi)或動(dòng)物的診斷或治療程序。它可能含有危險(xiǎn)成分。請(qǐng)參閱安全數(shù)據(jù)表 (SDS) 了解更多信息和正確處理程序。根據(jù)當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處理產(chǎn)品殘余物。本數(shù)據(jù)表在合理范圍內(nèi)盡可能準(zhǔn)確，但 Exalpha Biologicals 對(duì)本信息中的任何不準(zhǔn)確或遺漏不承擔(dān)任何責(zé)任。

參考 
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